Клинбиз | Клининговая компания в Нижнем Новгороде | Цены на клининговые услуги и уборку

Чтобы изучить вклад макрофагов LRP1 в метаболизм всего тела, LDLR — / — ^{и ЛПНП — / — ; macLRP1 — / — мышей помещали на западную диету на восемь недель, а вес тела измеряли дважды в неделю. ЛПНП — / — и ЛПНП — / — ; macLRP1 — / — мышей продемонстрировали аналогичную тенденцию к увеличению прироста массы тела; однако LDLR — / — ; У мышей macLRP1 — / — наблюдался значительно меньший прирост массы тела в процентах после восьми недель западного питания (). Затем мы провели внутрибрюшинный тест на толерантность к глюкозе (IPGTT). Начальные уровни глюкозы в крови натощак были одинаковыми для ЛПНП — / — и ЛПНП — / — ; macLRP1 — / — мышей ().Однако ЛПНП — / — ; Мыши macLRP1 — / — показали улучшенную толерантность к глюкозе с более низкой средней кривой глюкозы () и значительно более низкой средней площадью под кривой (AUC) () по сравнению с мышами LDLR — / — . Кроме того, LDLR — / — ; У мышей macLRP1 — / — уровень глюкозы в крови был значительно ниже через 5 и 15 минут (). Уровни инсулина в плазме во время IPGTT имели тенденцию к снижению: LDLR — / — ; macLRP1 — / — мышей; однако различия не были значительными ().}

Снижение набора массы тела и улучшение толерантности к глюкозе для ЛПНП ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей. ЛПНП ^{— / —} и ЛПНП ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей содержали на западной диете в течение 8 недель перед проведением теста на внутрибрюшинную толерантность к глюкозе (IPGTT). (а) Процент увеличения массы тела мышей через 8 недель ( ЛПНП ^{— / —} n = 14, ЛПНП ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} n = 11).Кривая IPGTT (введение глюкозы 1 мг / г), отображающая емкость клиренса глюкозы (b) и площадь под кривой (AUC, c) ЛПНП ^{— / —} ( n = 14) и ЛПНП ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} ( n = 13) мышей. (d) Уровни инсулина в плазме во время IPGTT ( LDLR ^{— / —} n = 8 и LDLR ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} n = 9). Данные представляют собой среднее значение ± SEM результатов. ^∗ п <0.05.

Интересно, что влияние дефицита LRP1 в макрофагах наблюдалось только у мышей на фоне LDLR ^{— / —} . Когда эксперименты с массой тела и метаболизмом глюкозы были повторены с macLRP1 ^{— / —} мышей на фоне ЛПНП дикого типа ( ЛПНП ^{+ / +} ), различий между ЛПНП ^{+ / +} не наблюдалось. и ЛПНП ^{+ / +} ; macLRP1 ^{— / —} мышей по массе тела, уровням глюкозы натощак, толерантности к глюкозе или уровням триглицеридов в плазме, даже если мышей поддерживали на западной диете в течение 17-18 недель, чтобы гарантировать, что любые незначительные различия, связанные с дефицитом LRP1 в будут наблюдаться макрофаги (Рисунок S1).

3.2. Воспаление печени ослаблено

Чтобы дополнительно охарактеризовать эффекты делеции LRP1 в макрофагах, мы исследовали уровни экспрессии нескольких генов, участвующих в опосредовании воспалительной реакции в печени ЛПНП ^{— / —} и ЛПНП ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей, получавших западную диету в течение двух недель. Количественный анализ печени с помощью ОТ-ПЦР с использованием ПЦР-массива воспалительных цитокинов и рецепторов мышей (Qiagen) выявил семь генов, которые были значительно подавлены в LDLR ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей: Ccl3 , Ccl4 , Ccl8 , Ccr1 , Ccr2 , Cxcl9 и Tnf ().Мы также проанализировали уровни экспрессии генов рецептора инсулина ( Insr ) и Glut2 ( Slc2a2 ), поскольку Ding et al. показали, что делеция LRP1 в печени приводит к заметному ослаблению этих белков [20]. Количественный анализ ОТ-ПЦР не показал изменений в содержании этих генов в печени ЛПНП ^{— / —} и ЛПНП ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей, получавших западную диету в течение двух недель ().

Экспрессия LRP1 увеличивала вызванное диетой воспаление печени у мышей.а) ЛПНП ^{— / —} и ЛПНП ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей содержали на западной диете в течение 2 недель. Печень обрабатывали и анализировали на наличие воспалительных цитокинов Ccl3, Ccl4, Ccl8, Ccr1, Ccr2, Cxcl9, и Tnf с помощью количественной ОТ-ПЦР ( n = 3). (b) Уровни экспрессии рецептора инсулина и Glut2 ( Insr и Slc2a2 соответственно) анализировали на изобилие с помощью количественной ОТ-ПЦР ( n = 3).Данные представляют собой среднее значение ± SEM результатов. ^∗ p <0,05, ^∗∗ p <0,01.

3.3. Регуляция сигнальных путей метаболизма глюкозы в печени в

В дополнение к анализу экспрессии генов, связанных с воспалением, мы также исследовали активацию нескольких сигнальных путей на уровне белка в печени ЛПНП ^{— / —} и ЛПНП ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей, получавших западную диету в течение двух недель.Мышей помещали на западную диету на две недели, а печень обрабатывали и анализировали с помощью иммуноблоттинга для идентификации дифференциально фосфорилированных белков (таблица S1). Киназа гликогенсинтазы 3 (GSK3) представляет собой многофункциональную киназу, которая участвует в метаболизме глюкозы и других различных физиологических путях. GSK3 имеет две изоформы ( α и β ), которые обладают обширной гомологией последовательностей и имеют сходные, но не повторяющиеся функции [21]. Активность этой конститутивно активной серин-треонинкиназы регулируется фосфорилированием определенных остатков.GSK3 α ингибируется фосфорилированием по серину-21 (S21) протеинкиназой B [22], а GSK3 β активируется фосфорилированием по тирозину-216 (Y216) [23]. Недавно сообщалось, что активность GSK3 β регулируется фосфорилированием C-концевого остатка треонина-390 с помощью p38 MAPK [24]. Анализ фосфопротеинов выявил два белка, которые были значительно менее фосфорилированы в печени: LDLR ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей, GSK3 α (S21) и p38 MAPK (T180, Y182) и без изменений в GSK3 β (Y216) ().Этот результат предполагает уникальную роль LRP1 в регуляции функции GSK3 и, таким образом, в модуляции метаболизма глюкозы. Вместе эти результаты предполагают, что печень из LDLR ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей, зараженных западной диетой, обладают меньшим провоспалительным действием и подтверждают наши данные о перитонеальных макрофагах.

Регуляция сигнальных путей метаболизма глюкозы в печени LDLR ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей, зараженных западной диетой. ЛПНП ^{— / —} и ЛПНП ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей содержали на западной диете в течение 2 недель. Печень обрабатывали и анализировали на уровни фосфопротеинов с помощью иммуноблоттинга Kinexus (a, n = 2). Слева указаны маркеры молекулярной массы. Полосы в кружке относятся к GSK3 α (1), GSK3 β (2) и p38 MAPK (3). (b) Количественную оценку иммуноблотов проводили с использованием программного обеспечения для скрининга профилей фосфопротеинов Kinexus KCPS-1.3.(c) содержание жира в печени было визуализировано в ЛПНП, ^{— / —} , и ЛПНП, ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей, содержавшихся на западной диете в течение 4 недель путем окрашивания гематоксилином и эозином (H&E). Репрезентативные микрофотографии (20x) срезов печени из ЛПНП ^{— / —} ( n = 8) и ЛПНП ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} ( n = 9) мышей. (d) Печеночные экспрессии LRP1 в LDLR ^{— / —} и LDLR ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей ( n = 4), которых содержали на западной диете в течение 8 недель.Печень обрабатывали и анализировали на уровни LRP1 с помощью иммуноблоттинга. (e) Результаты иммуноблота в (d) количественно оценивали денситометрией с использованием программного обеспечения NIH ImageJ и нормализовали до Hsp90 ( p = 0,25). Данные представляют собой среднее значение ± SEM результатов. ^∗ p <0,05.

Мы продолжили наше исследование влияния дефицита LRP1 макрофагов на содержание жира в печени путем анализа в печени ЛПНП ^{— / —} и ЛПНП ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей, получавших западную диету в течение четырех недель.Окрашивание срезов печени гематоксилином и эозином (H&E) не показало разницы в накоплении жира в этих печени (). На экспрессию LRP1 в печени не влияет делеция LRP1 макрофагов, как показывает иммуноблоттинг LRP1 экстрактов печени из LDLR ^{— / —} и LDLR ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей, получавших западную диету в течение восьми недель (Фигуры и). Этот результат подтверждает неизменный печеночный клиренс активированного α . ₂ -макроглобулин, классический лиганд LRP1, который, как известно, захватывается гепатоцитами [25], LRP1 в LDLR ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей, как сообщалось ранее [16].

3.4. LRP1-дефицитные перитонеальные макрофаги менее провоспалительны и могут модулировать метаболизм холестерина

Центральная роль липопротеинов в системных воспалительных состояниях, таких как атеросклероз, хорошо известна. Мы решили продолжить изучение воспалительной реакции макрофагов, выделенных из ЛПНП ^{— / —} и ЛПНП ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей, получавших стандартную пищу. Вызванные тиогликолатом перитонеальные макрофаги выделяли и обрабатывали PBS (контроль) или 50 нг / мл LPS в течение 24 часов, и измеряли уровни IL-6 в кондиционированной среде.LPS-индуцированная продукция IL-6 в LDLR ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей было ослаблено по сравнению с LDLR ^{— / —} мышей (). Хотя уровни IL-6 не достигли значимости, этот результат позволяет предположить, что LRP1-дефицитные макрофаги могут быть менее провоспалительными при выделении от необработанных наивных мышей. Чтобы определить потенциальную роль макрофага LRP1 в метаболизме липопротеинов и выявить любые различия при введении западной диеты, мы исследовали уровни экспрессии нескольких генов, участвующих в передаче сигналов липопротеинов и метаболизме холестерина.Количественный анализ ОТ-ПЦР перитонеальных макрофагов, выделенных из ЛПНП ^{— / —} и ЛПНП ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей, получавших стандартную пищу или западную диету в течение двух недель, выявили три гена, которые регулировались дифференцированно: Fdps , Pcsk9 и Soat1 (). Уровни матричной РНК для фарнезилдифосфатсинтетазы ( Fdps ) (левая панель), ключевого фермента, участвующего в биосинтезе изопреноидов и катализирующего образование нескольких метаболических предшественников, значительно снижены в LDLR ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} перитонеальных макрофагов, выделенных от мышей, получавших кормовую диету.Однако при переходе на западную диету уровни мРНК Fdps значительно снизились в перитонеальных макрофагах ^{— / —} перитонеальных макрофагов по сравнению с таковыми на диете, в то время как уровни остались неизменными в LDLR ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} перитонеальные макрофаги независимо от диеты. Уровни матричной РНК для пропротеинконвертазы субтилизин / кексин типа 9 ( Pcsk9 ) (центральная панель), медиатора плазменного гомеостаза холестерина и лиганда для членов семейства LDLR, значительно повышены в LDLR ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} перитонеальных макрофагов, выделенных от мышей, получавших кормовую диету.При переходе на западную диету уровни мРНК Pcsk 9 значительно снизились в LDLR ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} перитонеальных макрофагов по сравнению с макрофагами на диете, в то время как уровни оставались неизменными в ЛПНП ^{— / —} перитонеальных макрофагах независимо от диеты. Результаты, аналогичные Pcsk9 , также наблюдались для уровней мРНК стерол-O-ацилтрансферазы 1 ( Soat1 ) (правая панель), фермента, локализованного в ER и катализирующего образование сложных эфиров холестерина.В совокупности эти результаты предполагают, что циркулирующие LRP1-дефицитные макрофаги на фоне LDLR ^{— / —} обладают меньшим провоспалительным действием и могут влиять на метаболизм холестерина.

LRP1 модулирует воспалительную реакцию и метаболизм холестерина в макрофагах. (а) Вызванные тиогликолятом перитонеальные макрофаги, выделенные из ЛПНП ^{— / —} и ЛПНП ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} Мышей заражали PBS (контроль) или 50 нг / мл LPS в течение 24 часов.LPS-индуцированную продукцию IL-6 измеряли в кондиционированной среде ( n = 3). (б) ЛПНП ^{— / —} и ЛПНП ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} Мышей содержали на стандартной или западной диете в течение 2 недель, и РНК выделяли из перитонеальных макрофагов, вызванных тиогликолятом. МРНК Fdps , Pcsk9, и Soat1 анализировали с помощью количественного анализа RT-PCR (chow n = 2; Western n = 3).Данные представляют собой среднее значение ± SEM результатов. Двусторонний дисперсионный анализ ANOVA был использован для оценки статистической значимости различий между группами и эффекта западной диеты. ^∗ p <0,05, ^∗∗ p <0,01, ^∗∗∗∗ p <0,0001.

3.5. LRP1 непосредственно связывается с sFRP-5 и может модулировать передачу сигналов Wnt

Было показано, что неканоническая передача сигналов Wnt способствует ожирению, инсулинорезистентности и воспалению. Члены семейства секретируемых Frizzled-связанных белков (sFRP) конкурируют с трансмембранными рецепторами Frizzled за лиганды Wnt и могут модулировать путь передачи сигналов Wnt.Предыдущие исследования, проведенные Ouchi et al. показали, что секретируемый белок 5 (sFRP-5) является противовоспалительным адипокином, который может опосредовать ожирение и метаболический синдром [5]. Изучить, является ли sFRP-5 потенциальным молекулярным механизмом, лежащим в основе улучшенной толерантности к глюкозе, сниженного набора массы тела и менее провоспалительного фенотипа, наблюдаемого в LDLR ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей, уровни sFRP-5 в крови были измерены в LDLR ^{— / —} и LDLR ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей.До перехода на западную диету ЛПНП ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей имели значительно более высокие уровни базового sFRP-5 в плазме по сравнению с LDLR ^{— / —} мышей (, 0 недель). После помещения на западную диету на восемь недель ЛПНП ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей показали значительное снижение уровней sFRP-5, достигнув уровней, сравнимых с уровнями, измеренными у LDLR ^{— / —} мышей (, 8 недель). Напротив, уровни циркулирующих sFRP-5 у мышей LDLR, ^{— / —} оставались неизменными при введении западной диеты.

LRP1 напрямую связывается с sFRP-5 и может модулировать передачу сигналов Wnt. (a) Уровни sFRP-5 в плазме LDLR ^{— / —} ( n = 13) и LDLR ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} ( n = 11) мышей до и после содержания на западной диете в течение 8 недель. (b) Связывание возрастающих концентраций sFRP-5 (1,6, 3,1, 6,3, 12,5, 25, 50 и 100 нмоль / л) с LRP1, иммобилизованным на поверхности сенсорного чипа Biacore. (в) R Значения _eq , определенные путем подгонки данных ассоциации в (b) к процессу псевдопервого порядка с неспецифическим компонентом, были перенесены на другую графику.концентрации sFRP-5 и K _D значение 32 ± 3 нМ определяли с помощью нелинейного регрессионного анализа. Данные представляют собой среднее значение ± SEM трех независимых экспериментов. ^∗ p <0,05.

Два члена семейства LRP, LRP5 и LRP6, являются корецепторами для трансмембранного рецептора лиганда Wnt Frizzled и могут модулировать путь передачи сигнала Wnt / β -катенин. Из-за более высоких циркулирующих уровней sFRP-5, наблюдаемых в LDLR ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей на исходном уровне, эксперименты по связыванию были выполнены, чтобы проверить, взаимодействует ли sFRP-5 напрямую с LRP1.Эксперименты по поверхностному плазмонному резонансу (SPR) показали, что sFRP-5 напрямую связывается с очищенным LRP1 в зависимости от концентрации (). Данные были подогнаны под процесс псевдопервого порядка с добавлением неспецифического компонента для определения максимальных единиц отклика при равновесии ( R _экв ). R Затем были построены графики зависимости _экв. значений от концентрации для определения K _D значение 32 ± 3 нМ (). Эти результаты показывают, что LRP1 непосредственно связывается с sFRP-5, тем самым влияя на активацию неканонического пути передачи сигналов Wnt.

4. Обсуждение

Как член семейства рецепторов LDL, основная эндоцитарная функция LRP1 включает удаление остатков хиломикронов из кровотока. Недавние исследования выявили важную роль LRP1 в модуляции передачи сигналов инсулина и гомеостаза глюкозы во многих тканях и предполагают сложное взаимодействие с его ролью в метаболизме липопротеинов [26]. В текущем исследовании мы использовали мышей с дефицитом ЛПНП, которых придерживались диеты с высоким содержанием жиров, холестерина и сахарозы (западная), модель на мышах, которая хорошо подходит для исследования воспаления печени при неалкогольной жировой болезни печени [27].Результаты наших исследований показывают, что экспрессия LRP1 в макрофагах способствует воспалению печени посредством процесса, который, по-видимому, включает регуляцию пути передачи сигналов Wnt. Сначала мы демонстрируем, что LDLR ^{— / —} ; У мышей macLRP1 ^{— / —} улучшилась толерантность к глюкозе и чувствительность к инсулину, и они набрали меньшую массу тела при питании по западной диете. Во-вторых, в сочетании с улучшенным метаболизмом глюкозы как перитонеальные макрофаги, так и печень изолированы от LDLR ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей продуцировали более низкие уровни провоспалительных цитокинов по сравнению с LDLR ^{— / —} однопометников.В-третьих, мы обнаружили, что циркулирующие уровни sFRP-5 повышены в LDLR ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей, и в-четвертых, мы использовали эксперименты SPR для подтверждения связывания с высокой аффинностью sFRP-5 с LRP1, обнаружив, что sFRP-5 является новым лигандом LRP1. sFRP-5 представляет собой мощную противовоспалительную молекулу, которая модулирует метаболическую дисфункцию при ожирении, связывая и секвестрируя Wnt5a, предотвращая его способность активировать сигнальный путь Wnt [11], а регулирование его уровней с помощью LRP1 обеспечивает вероятный механизм эффектов, которые мы наблюдаем. отметка в LDLR ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей.Интересно, что для демонстрации эффектов macLRP1 ^{— / —} на метаболизм глюкозы требовался фон ЛПНП, ^{— / —} , поскольку наши результаты не показали различий в массе тела, уровне глюкозы натощак, толерантности к глюкозе или триглицеридах плазмы. уровни, даже если мышей поддерживали на западной диете в течение 17–18 недель на фоне ЛПНП ^{+ / +} . Вероятно, это происходит из-за резкого (> 10-кратного) повышения уровня холестерина и триглицеридов в плазме у мышей, лишенных рецептора ЛПНП, при кормлении западной диетой [28], который дополнительно увеличивается в LDLR ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей [16].Напротив, уровни холестерина и триглицеридов в плазме изменяются только примерно в 2 раза у мышей LDLR ^{+ / +} на западной диете [28].

На основании наших результатов мы предлагаем модель (правая панель), в которой LRP1 модулирует путь передачи сигналов Wnt, напрямую связываясь с sFRP-5 и эффективно удаляя эту молекулу, опосредуя ее клеточное поглощение и последующую деградацию. В результате удаления этого ингибитора лиганды Wnt могут связывать Fz и корецептор LRP5 / 6, что приводит к активации пути передачи сигнала Wnt.Благодаря неизвестным механизмам наши данные также показали, что экспрессия LRP1 приводит к увеличению активации p38 MAPK, что может привести к инактивации GSK3 и накоплению β -катенина (правая панель). Напротив, в отсутствие LRP1 (левая панель) sFRP-5 функционирует как рецептор-ловушка и секвестрирует лиганды Wnt и тем самым ослабляет передачу сигналов Wnt, что приводит к менее провоспалительному состоянию.

Предполагаемая роль макрофага LRP1 в воспалительных состояниях, вызванных диетой.В провоспалительных условиях макрофаг LRP1 секвестрирует sFRP-5, чтобы модулировать путь передачи сигнала Wnt и его нижестоящие эффекторы. LRP1 опосредует активацию p38 MAPK, которая, в свою очередь, инактивирует GSK3. Это вызывает нарушение толерантности к глюкозе, нарушение регуляции метаболизма гликогена и резистентность к инсулину. В целом у мышей наблюдается увеличение массы тела с нарушением метаболической функции. APC: аденоматозный полипоз кишечной палочки; Двл: растрепанный; Fz: вьющиеся; sFRP-5: секретируемый белок 5, родственный Frizzled; GSK3: киназа гликогенсинтазы 3; LRP1: белок 1, связанный с рецептором липопротеинов; LRP5 / 6: белок 5/6, связанный с рецептором липопротеинов; p38 MAPK: митоген-активированная протеинкиназа p38; TCF / LEF: фактор Т-лимфоцитов / фактор увеличения лимфоида; Wnt: сайт интеграции, посвященный бескрылым.

Каноническая передача сигналов Wnt строго регулирует адипогенез, поддерживая преадипоциты в недифференцированном состоянии [11]. Независимо от его роли в адипогенезе, недавние достижения продемонстрировали, что передача сигналов Wnt может оказывать как воспалительные, так и противовоспалительные эффекты, частично за счет модуляции пути NF- κ B [29]. Однако воспалительная роль белков Wnt широко варьируется в зависимости от тканевых и патофизиологических контекстов. Работа Gustafson и Smith показала, что как IL-6, так и TNF- α поддерживают каноническую передачу сигналов Wnt и ингибируют дифференцировку преадипоцитов и накопление липидов [3].Кроме того, IL-6 и TNF- α способствовали воспалительному фенотипу адипоцитов, обеспечивая связь между воспалением слабой степени, ожирением, инсулинорезистентностью и T2D. Неканоническая передача сигналов Wnt, в частности активация с помощью Wnt5a, также, как было показано, способствует экспрессии провоспалительных цитокинов в макрофагах, что приводит к воспалению жировой ткани и нарушению гомеостаза глюкозы [7, 8]. Внеклеточные антагонисты сигнального пути Wnt предотвращают взаимодействия лиганд-рецептор и включают членов семейства Dickkopf (Dkk), фактор ингибирования Wnt-1 (WIF-1), Cerberus (CER1) и члены семейства секретируемых frizzled-related белков (sFRP) [30 ].sFRP связываются непосредственно с Wnt, и исследования Ouchi et al. показали, что sFRP-5 представляет собой противовоспалительный адипокин, который модулирует реакцию макрофагов жировой ткани, толерантность к глюкозе и стеатоз печени [5]. Дополнительные исследования на людях подтвердили, что более низкие уровни sFRP-5 коррелируют с ожирением, нарушением толерантности к глюкозе, инсулинорезистентностью и СД2 [31, 32]. В совокупности наши результаты подтверждают, что LRP1 может модулировать как канонические, так и неканонические пути передачи сигналов Wnt, и необходимы дальнейшие исследования для определения участия LRP1 в регуляции уровней и функции специфических белков Wnt.

Наши результаты, по-видимому, противоречат существующей литературе, демонстрирующей атеропротекторную роль макрофага LRP1 и его способность оказывать противовоспалительное действие [33–41]. Существует несколько правдоподобных объяснений наблюдаемых расхождений между текущим исследованием и существующей литературой. Во-первых, многие исследования, в которых сообщалось о противовоспалительном эффекте макрофага LRP1, проводились на мышах на инбредном фоне C57BL / 6. Напротив, наши эксперименты проводились на мышах на смешанном фоне C57BL / 6 × 129S6 / SvEv с использованием контрольных братьев и сестер.В многочисленных исследованиях сообщалось о различиях воспалительных и метаболических реакций на диету с высоким содержанием жиров, которые зависели от генетического фона мышей [42–45], и также вероятно, что большая вариабельность воспалительной и метаболической реакции свойственна мышам с смешанный фон по сравнению с инбредными мышами. Во-вторых, в нескольких исследованиях в существующей литературе используется трансплантация костного мозга (BMT) для трансплантации донорского костного мозга macLRP1 ^{— / —} облученным мышам-реципиентам LDLR ^{— / —} .Хотя этот метод хорошо зарекомендовал себя для изучения гемопоэтических клеток в развитии атеросклероза, известные физиологические эффекты облучения, такие как отсутствие прибавки в весе и желудочно-кишечный синдром, делают этот метод менее подходящим для изучения ожирения и СД2 [46]. Также вероятно, что ответ макрофагов BMT в микросреде атеросклеротического поражения будет отличаться от ответа резидентных макрофагов в микросреде печени или жировой ткани. Наконец, модуляторы воспаления, такие как ремоделирование сосудов, вызванное перевязкой сонной артерии [47] и состав рациона грызунов [48], будут влиять на ответ макрофагов.В нашем исследовании используется хорошо задокументированная генетически модифицированная линия мышей для изучения влияния типичной западной диеты человека на реакцию макрофагов. Эта модель позволяет нам исследовать циркулирующие и тканеспецифичные резидентные макрофаги в их микроокружении без влияния факторов, которые могут изменить иммунный ответ.

Еще один момент, который следует учитывать, — это новая двойная роль LRP1 в возникновении и регрессе атеросклероза, о которой недавно сообщили Mueller et al. [49]. В этом исследовании авторы продемонстрировали, что макрофаги с дефицитом LRP1 напрямую способствуют обратному транспорту холестерина и переходу к противовоспалительному фенотипу, достигая регрессии атеросклероза, вызванного западной диетой.Это элегантное исследование подчеркивает сложную роль LRP1 как в развитии, так и в регрессе атеросклероза. В этом отношении измененные экспрессии Pcsk9 и Fdps в LRP1-дефицитных перитонеальных макрофагах в нашем исследовании указывают на более провоспалительную роль LRP1 и подтверждают двойную и противоположную роль LRP1 в модуляции воспалительного ответа. Это может объяснить ослабление воспаления печени в LDLR ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мышей, зараженных западной диетой, наблюдаемых в текущем исследовании.

Наши исследования также, по-видимому, противоречат защитному эффекту печеночного LRP1 против печеночной инсулинорезистентности и стеатоза [20] и нейронального LRP1 в предотвращении непереносимости глюкозы в головном мозге [50]. В Ding et al. Согласно исследованию, инактивация LRP1 в гепатоцитах приводила к ожирению, инсулинорезистентности, гипергликемии и стеатозу печени, когда мышей переводили на диету с высоким содержанием жиров. Это происходило за счет подавления экспрессии рецептора инсулина и транслокации GLUT2 к плазматической мембране.Кроме того, исследование показало, что дефицит LRP1 гепатоцитов связан с усилением липогенеза за счет повышенной экспрессии Scd1 и Gpd1 . Различия между Ding et al. исследование и наше текущее исследование может быть связано с чрезмерным поглощением липидов макрофагами, экспрессирующими LRP1, поскольку мы ранее продемонстрировали, что LRP1 усиливает накопление холестерина и образование пенистых клеток в макрофагах [16]. Известно, что чрезмерное поглощение липидов макрофагами запускает сложную стерин-чувствительную сеть [51].

Независимо от его функции в эндоцитозе липопротеидов, текущее исследование показывает, что макрофаг LRP1 может также модулировать состояние активации GSK3 через несколько путей. GSK3 кодируется двумя разными генами, в результате чего образуются две изоформы, α и β , обладающие 97% гомологией. В отличие от других серин / треониновых киназ, GSK3 является конститутивно активным, и фосфорилирование GSK3 α по Ser21 и GSK3 β по Ser9 ингибирует активность киназы GSK3 [22].Большинство исследований функции и регуляции GSK3 было сосредоточено в первую очередь на изоформе β , и мало что известно о роли GSK3 α . Хотя изоформы имеют схожие функции, исследование Hoeflich et al. предположили, что GSK3 α неспособен компенсировать нарушение гена GSK3 β в эмбриональных стволовых клетках мыши 129J [52]. Исследования также показали, что GSK3 α , но не изоформа β , необходима для выживания кардиомиоцитов [53], а GSK3 α регулирует процессинг АРР и продукцию пептидов A β [54] в дополнение к его роль в формировании аксонов [55] и развитии коры [56].Интересно, что Patel et al. обнаружили, что тканеспецифическая делеция GSK3 α в скелетных мышцах или печени мышей не приводит к значительным различиям в чувствительности к глюкозе или инсулину по сравнению с однопометными животными дикого типа [57]. Эти результаты, по-видимому, противоречат результатам Ciaraldi et al. которые продемонстрировали, что нокдаун GSK3 α в культивируемых скелетных мышцах человека приводит к улучшенному действию инсулина [58].

В нашем текущем исследовании печень из ЛПНП ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} мыши, получавшие западную диету в течение восьми недель, имели значительно более низкие уровни фосфорилированного GSK3 α (Ser21) по сравнению с LDLR ^{— / —} однопометников, что свидетельствует о более высоких уровнях активности GSK3 α ; однако мы не наблюдали каких-либо различий в фосфорилировании GSK3 β по Tyr216, которое важно для активности киназы.Эти результаты предполагают дифференциальную роль GSK3 α и GSK3 β в модели воспаления печени, вызванного диетой, и активность GSK3 в клетках Купфера, макрофагах, резидентных в печени, вероятно, способствует воспалительному состоянию печени. Необходимы дополнительные исследования, чтобы выявить перекрывающиеся и уникальные роли изоформ GSK3 в различных типах тканей. Анализ фосфопротеинов также выявил значительно более низкие уровни фосфорилированного p38 MAPK (T180, Y182) в LDLR ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} печень.Исследования Thornton et al. продемонстрировали, что p38 MAPK способен фосфорилировать GSK3 β на С-конце, что приводит к инактивации GSK3 β и накоплению β -катенина [24]. Вероятно, что более низкие уровни фосфорилированного p38 MAPK приводят к меньшему ингибированию GSK3 β и увеличению деградации β -катенина, что способствует менее провоспалительному фенотипу, наблюдаемому в LDLR ^{— / —} ; macLRP1 ^{— / —} печень.Механизмы, с помощью которых макрофаг LRP1 модулирует активность p38 MAPK, в настоящее время неизвестны, и вероятно, что активность p38 MAPK модулируется посредством интеграции нескольких сигнальных путей.

Новости — Sicardi | Айерс | Бачино

Мелани Смит

10-я Ливерпульская биеннале, крупнейший фестиваль современного визуального искусства в Великобритании, открывается для публики в субботу, 14 июля 2018 года, отмечая свое 20-летие с выставками, представлениями, кинопоказами, семейными мероприятиями и беседами.Биеннале продлится 15 недель до 28 октября 2018 года в общественных местах Ливерпуля, галереях, музеях, общественных зданиях и в Интернете.

Мария Фернанда Кардосо и Лилиана Портер и другие

Анонимные женщины-ремесленницы из Чили, Таня Бругера, Кристина Эрнандес Ботеро, Маргарита Кабрера, Мелисса Кальдерон, Мария Фернанда Кардосо, Мельба Карилло, Марта Чилиндрон, Алессандра Экспосито, Илиана Эмилия Гарсия, Шерезад Гаросиаэ, Кармен Кесменика Гессера, Кармен Гессера Ломас Гарса, Эвелин Лопес де Гусман, Анна Мария Майолино, Глендалис Медина, Ана Мендьета, Марина Нуньес дель Прадо, Лилиана Портер, Ракель Рабинович, Ница Туфиньо

Extra Virgin Press — Страница 2 — Высокая печать в Майами

Аэропорт закупает работы у 14 художников, которые будут включены в коллекцию произведений искусства МВД

(Майами, 16 сентября 2020 г.) — Международный аэропорт Майами поддерживает экосистему местного искусства в округе Майами-Дейд во время пандемии, закупая работы у 14 местных художников.Произведения искусства будут представлены на выставке, запланированной на 2021 год, а затем они будут выставлены в различных местах по всему аэропорту.

14 произведений современного искусства, состоящие из картин, фотографий и работ на бумаге, были отобраны в ходе строгого процесса отбора группой из шести человек, в которую входили местные специалисты в области искусства и музейного дела, включая кураторов и администраторов программ паблик-арта. Члены жюри во время первого звонка MIA артистам, объявленного в июле, рассмотрели 253 заявки от 157 художников.Заявки на рассмотрение должны были представлять собой существующие двумерные произведения искусства, созданные в течение последних трех лет художниками, продемонстрировавшими опыт работы в сфере паблик-арта и / или имеющими историю выставок произведений искусства в галереях, музеях и пространствах альтернативного искусства. Художники также должны были жить и работать в округе Майами-Дейд.

«Цели этой инициативы по приобретению — продемонстрировать широкий и разнообразный спектр талантов, которые может предложить наше местное художественное сообщество, и разделить наше финансирование между несколькими работающими художниками в то время, когда возможностей меньше», — сказал Джендри Шерер, Директор отдела изобразительного искусства и культуры МВД.«Мы также гордимся тем, что продолжаем представлять выставки через галереи MIA, где художники Южной Флориды могут ежедневно выставлять свои работы перед международной аудиторией».

Окончательно отобранные художники составляют разнообразную группу из разных художественных практик: Мария Тереза ​​Барбист; Лухан Кандрия; Амалия Капуто; Кара Деспейн; Анник Дювивье; Кэрол Джаззар; Регина Джестроу; Моника Лопес де Виктория; Аддонис Паркер; Наджа Мун; Ян Патрик О’Коннор; Кристина Петтерссон; Сильвия Рос; и Том Девственница.

«Я хочу поблагодарить MIA за эту возможность выставить мои работы в аэропорту», ​​- сказал Дювивье.